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蘇州千舍生物,新增幾百株含STR鑒定細(xì)胞,來源明了,代數(shù)靠前,細(xì)胞狀態(tài)良好,采取順豐快遞運輸,可以發(fā)復(fù)蘇和凍存細(xì)胞!
細(xì)胞名稱:AGS 人胃腺癌細(xì)胞
來源:人
細(xì)胞特性:貼壁
培養(yǎng)條件:90%F-12K+10%FBS
凍存條件:90%*培養(yǎng)液+10%DMSO
對于這些實驗小白來說,養(yǎng)細(xì)胞肯定會遇到各種各樣的問題,那么,千舍生物給您指點一二:
如何判斷細(xì)胞污染了?
狀態(tài) 1: 細(xì)胞培養(yǎng)液變渾濁了,經(jīng)常見到是米湯樣,黃色液體,一般認(rèn)為細(xì)菌污染。
狀態(tài) 2:細(xì)胞培養(yǎng)基內(nèi)含有能動的小黑點,一般認(rèn)為是黑膠蟲。
狀態(tài) 3:胞培養(yǎng)基清亮,但是能看到飄在培養(yǎng)液帶有毛毛的白色的菌狀物質(zhì),有可能就是真菌感染。
策略:細(xì)胞污染了就直接扔了,還得把培養(yǎng)箱用酒精棉球擦干凈,并用紫外照射半小時,防止再次污染。同時建議細(xì)胞培養(yǎng)時,在培養(yǎng)基中加入青鏈霉素 (尤其是初學(xué)者)
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,細(xì)胞周圍包括細(xì)胞上有很多小黑點,怎么辦?
策略 1:用胰酶消化下來后,低速短時間離心,不同實驗室不一樣,如果平時是 1 000 轉(zhuǎn) 5 min 的話,就可以改為 700 轉(zhuǎn) 3 min,用新的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞,細(xì)胞收集是少一點,但是一般都能干凈很多。多傳幾代就好多了。
策略 2:如果多次嘗試之后還是不干凈,就懷疑是否存在支原體污染了,用抗支原體藥就 OK 了。一般用上 3~5 天,細(xì)胞就干干凈凈了。
細(xì)胞培養(yǎng)過程中,發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞表面沾了很多死細(xì)胞,傳代過程中一直存在怎么破?
有一招屢試不爽,那就是用 PBS 洗兩遍之后,加胰酶進(jìn)去,晃一晃,迅速將胰酶倒出,再用 PBS 洗一下,再加胰酶正常消化。死細(xì)胞由于粘附能力很弱,一次加胰酶進(jìn)去以后會掉下來,第二次加胰酶下來的細(xì)胞才是活性比較強(qiáng)的細(xì)胞。整完一次之后,再次傳代方法同上,一般 2~3 次之后,細(xì)胞就完好如初了。
全部提供STR鑒定
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