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如何挑選合適的elisa試劑盒？
更新時(shí)間：2022-05-11　點(diǎn)擊量：709

如何挑選合適的elisa試劑盒？



1、查找待測(cè)樣本的蛋白濃度

　　可以通過(guò)NCBI的文獻(xiàn)，給出的蛋白表達(dá)量參考值來(lái)比較elisa試劑盒給出的樣本值與報(bào)道值是否一致。


2、試劑盒的應(yīng)用種屬、檢測(cè)樣本的種類(lèi)

　　除試劑盒特別說(shuō)明外，一般不同種屬不能通用。常見(jiàn)待測(cè)樣本種類(lèi)有：血清和血漿（不同抗凝劑），細(xì)胞上清，和細(xì)胞裂解液，試劑盒中不同樣本的稀釋液不混用。


3、•.檢測(cè)范圍：

  •建立線性范圍：需測(cè)定9-11個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定3-4次。

•驗(yàn)證標(biāo)稱(chēng)線性參數(shù)：需測(cè)定4-6個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平重復(fù)測(cè)定3-4次。

•所有樣本應(yīng)在一次運(yùn)行中或幾次間隔很短的運(yùn)行中隨機(jī)測(cè)定，最好在一天之內(nèi)完成。


4、試劑盒的其它指標(biāo)

a. 靈敏度：

•示例：人IL-13的低可檢測(cè)濃度為0.1 pg/ml(6 次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)的平均值)。10 個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)品濃度 OD 的平均值加上兩倍SD，計(jì)算低可檢測(cè)濃度。

•注意：靈敏度跟檢測(cè)范圍低點(diǎn)不相等。

b.•穩(wěn)定性（重復(fù)性、精密性）

  •酶標(biāo)板內(nèi)精密度3 個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板內(nèi)重復(fù)測(cè)定 20 次，評(píng)估酶標(biāo) 板內(nèi)的精密度。酶標(biāo)板間精密度 3 個(gè)已知濃度的樣本酶標(biāo)板間重復(fù)檢測(cè) 6 次，評(píng)估酶標(biāo)板間的精密度。

  •試劑盒一般板內(nèi)變異系數(shù)小于10% ，板間變異系數(shù)小于15% （統(tǒng)計(jì)學(xué)概念）