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告客戶書:買來的WinSera血清需要過濾嗎?
WinSera血清使用前是否需要過濾?
本公司血清在ISO 13485認證的廠房中生產,經過3次0.1 μm過濾,出廠經過檢測并且會使用三種以上的細胞株進行培養(yǎng)測試及無菌檢測,污染幾率非常非常非常低(重要的事情說三遍)。通常細胞污染有非常多的可能性,根據(jù)協(xié)助使用者進行分析檢測,結果表明絕大部分都是因人為操作失誤導致污染。
因此買來的血清不需要再次進行過濾。
幾種血清的比較:
項目 | 等級 |
提取血清體積/只牛 | 成年牛血清(5-8L) > 小牛血清 (2L) > 國產胎牛血清 (1L) > 胎牛血清 (0.5L) |
培養(yǎng)細胞的效果 | 胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
價格 | 胎牛血清 > 國產胎牛血清 > 小牛血清 > 成年牛血清 |
這幾種不同牛齡血清所含的促細胞生長因子、促貼附因子、激素及其他活性物質等組分與比例不同。常規(guī)來說,年齡越小的牛血清,細胞培養(yǎng)效果越好。胎牛血清培養(yǎng)效果好于新生牛,且因為胎牛未進食過母乳,所以IgG含量低。故目前多數(shù)實驗人員選擇的都是胎牛血清進行細胞培養(yǎng)。
胎牛血清成分已知的已有上千多種,以下為主要成分表:
成分 | 濃度 | 成分 | 濃度 |
蛋白和多肽 | - | 磷脂 | 0.7-3.0 mg/ml |
白蛋白 | 20-50mg/ml | 丙酮酸 | 2-10 ug/ml |
胎球蛋白 | 10-20mg/ml | 碳水化合物 | - |
纖連蛋白 | 1-10 ug/ml | 葡萄糖 | 0.6-1.2 mg/ml |
球蛋白 | 1-15 mg/ml | 乳酸 | 0.5-2.0 mg/ml |
α-抗胰蛋白酶 | 0.5-2.5 mg/ml | 多胺 | - |
轉鐵蛋白 | 2-4 mg/ml | 丁二胺,亞精胺 | 0.1-1.0 uM |
生長因子 | - | 尿素 | 170-300 ug/ml |
EGF, PDGF, IGF-I, IL-1 | 1-100 ng/ml | 無機物 | - |
氨基酸 | 0.01-1.0 uM | 鈣,氯化物,鉀,磷 | - |
脂質 | - | 激素 | - |
膽固醇 | 10 uM | 胰島素 | 1-100 ng/ml |
脂肪酸 | 0.1-1.0 uM | 皮質醇 | 10-200 nM |
亞油酸 | 0.01-0.1 uM | 維生素 | 10 ng-10 ug/ml |
導致細胞污染的原因主要有以下幾方面:
環(huán)境:水浴鍋、培養(yǎng)箱水盤、細胞培養(yǎng)箱內壁、超凈臺、桌面及試劑瓶身、細胞房空氣消毒。
操作:細胞復蘇、傳代、凍存等過程中也可帶入污染。
試劑:血清、基礎培養(yǎng)基、胰酶、輔助試劑、營養(yǎng)添加物等。
耗材:培養(yǎng)皿或培養(yǎng)瓶、槍頭。
細胞本身:本身攜帶污染、細胞老化、分化等。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號 | 規(guī)格 | 庫存狀態(tài) |
優(yōu)級 | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級 | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現(xiàn)貨 |
如何進行污染源排查?
血清:其他試劑保持不變,僅更換血清。
基礎培養(yǎng)基:其他試劑保持不變,僅更換基礎培養(yǎng)基。
PBS:其他試劑保持不變,僅更換PBS。
胰酶:若細胞復蘇的很好,一傳代就污染,可以嘗試其他試劑保持不變,更換消化用胰酶,看細胞狀態(tài)。
細胞反復復蘇都會出現(xiàn)污染,那可保持培養(yǎng)體系不變,培養(yǎng)其他類型且適用于此培養(yǎng)體系的細胞,觀察是否有污染出現(xiàn)。整個營養(yǎng)體系:基礎培養(yǎng)基、血清、營養(yǎng)添加物都可使用控制變量法進行排查。
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