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胎牛血清熱滅活是必須的嗎?
1)加熱可以滅活補(bǔ)體系統(tǒng),激活的補(bǔ)體可以刺激平滑肌收縮,細(xì)胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞??蒲袑氉觽兛梢愿鶕?jù)自己的研究要求,決定是否對(duì)血清進(jìn)行熱滅活。
2)胎牛血清在全部解凍后,進(jìn)行輕微搖勻,放置56°C溫水浴中30分鐘即可滅活。在滅活過程中建議有規(guī)律的搖勻,使瓶?jī)?nèi)血清受熱均衡。也可使用無菌的小量容器將血清分裝后,再進(jìn)行熱滅活,但需要注意在分裝和熱滅活過程中防止污染。
3)若非必須,可以不需要做熱處理這一步。有實(shí)驗(yàn)顯示,經(jīng)過正確熱滅活處理的血清,對(duì)大多數(shù)的細(xì)胞而言是不需要的。經(jīng)此處理過的血清對(duì)細(xì)胞的生長(zhǎng)只有微小的促進(jìn),或全部沒有任何作用,甚至通常因?yàn)楦邷靥幚碛绊懥搜宓馁|(zhì)量,而造成細(xì)胞生長(zhǎng)速率的降低。而且經(jīng)過熱處理的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點(diǎn)",常常會(huì)讓研究者誤以為是血清遭受污染。