透析胎牛血清（WINSERA，F(xiàn)BS500-WDF-002）

品牌：WINSERA®

規(guī)格：500ml

說明：該產(chǎn)品僅供科研使用

品牌：WINSERA®國內(nèi)科研實驗室使用比較普遍，價格相對實惠，能滿足很多常規(guī)細胞的培養(yǎng)需求。

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胎牛血清的優(yōu)點

加濃度 5% 至 10% 的胎牛血清，為培養(yǎng)體系中的細胞（包括成纖維細胞）提供營養(yǎng)、附著因子和其他所需成分。血清還具有緩沖液的作用，可以減少 pH 值波動。血清中具有高含量的促生長因子，例如可最大限度地促進細胞生長的大分子和載體蛋白。由于胎牛血清 (FBS) 來源于胎牛，其抗體含量自然較低。因而成為常用的血清類型。

胎牛血清是在封閉的屠宰機構(gòu)對未發(fā)育*的胎牛的心臟穿刺取血而獲取的牛血清制品，牛血清制品隨著取血對象的年齡變化可分為胎牛血清，新生牛血清以及（成年）牛血清，血清的成分及含量會隨年齡變化。而胎牛血清由于血清采集時間早，其胎球蛋白較多，并富含多種生長因子。同時，由于未接觸外界環(huán)境，胎牛血清所含的內(nèi)毒素、補體等細胞有害成分和抗體水平均是較低的。因此，胎牛血清從細胞培養(yǎng)的效果來看是優(yōu)質(zhì)的牛血清制品，在細胞培養(yǎng)的應(yīng)用較為廣泛。

胎牛血清 (FBS) 包含什么成分？

胎牛血清含有多種營養(yǎng)因子和大分子因子，例如氨基酸、脂質(zhì)和糖類。胎牛血清的抗體含量非常低，而生長因子含量很高，因而可以優(yōu)化細胞培養(yǎng)過程。由于胎牛血清 (FBS) 的組分尚未*明確，因此各批次的成分可能不同。這種血清可能包含 1000 多種組分。

胎牛血清 (FBS) 產(chǎn)品有哪些類型？

胎牛血清產(chǎn)品的類型很多，因來源、加工和檢測而異。每一批血清都要先進行過濾，然后混合并分裝。該步驟即所謂的“真混合工藝"，旨在確保每瓶血清之間均勻一致。該技術(shù)可以提高血清產(chǎn)品的一致性與質(zhì)量。

業(yè)內(nèi)通常會根據(jù)不同產(chǎn)地的牛疫情情況，將胎牛血清分為特級胎牛血清以及優(yōu)質(zhì)胎牛血清。例如新西蘭全境、澳大利亞及北美的部分區(qū)域從未爆發(fā)過瘋牛病（BSE）和口蹄疫（FMD）疫情，因此這些產(chǎn)地的胎牛血清被定義為特級胎牛血清；而南美的胎牛血清則被定義為優(yōu)質(zhì)胎牛血清。

胎牛血清 (FBS) 自不同國家或地區(qū)的血液。主要有三個類別：

優(yōu)級胎牛血清 (FBS)：適合擔(dān)心細胞培養(yǎng)物可能受牛海綿狀腦病 (BSE) 污染的用戶。此類產(chǎn)品源自新西蘭和澳大利亞。

標準胎牛血清 (FBS)：通常用于研究領(lǐng)域的常見細胞類型培養(yǎng)。

其他類型的胎牛血清產(chǎn)品包括：

特色產(chǎn)品，例如透析型胎牛血清 (FBS) 和經(jīng) USDA 進口測試的胎牛血清 (FBS)

專用產(chǎn)品，例如專門用于特定細胞培養(yǎng)的胚胎干細胞專用胎牛血清 (FBS) 和昆蟲細胞專用胎牛血清 (FBS)。

胎牛血清 (FBS) 在細胞培養(yǎng)中的常見用于以下領(lǐng)域的體外真核細胞培養(yǎng)：

疫苗生產(chǎn)

生物技術(shù)研究與生產(chǎn)

干細胞研究

動物診斷

生物制藥

WINSERA® Fetal Bovine Serum 胎牛血清目錄如下：

小鼠肝實質(zhì)細胞 AML-12

小鼠氣道平滑肌細胞 ASMC

小鼠腦神經(jīng)膠質(zhì)母細胞 G422

小鼠精原細胞系 GC-1 spg

小鼠主動脈內(nèi)皮細胞 MAEC

小鼠骨樣細胞 MLO-Y4

小鼠肺上皮細胞 MLE-12

小鼠腎臟內(nèi)髓集合管3上皮細胞 IMCD3

小鼠胚胎成纖維細胞 3T3-L1

小鼠乳腺癌細胞 4T1

小鼠乳腺癌細胞熒光素酶標記 4T1+luc

小鼠巨噬細胞 Ana-1

小鼠黑色素瘤細胞 B16

小鼠黑色素瘤細胞 B16-F10

小鼠黑色素瘤細胞熒光素酶標記 B16-F10+LUC

小鼠原B細胞株 BAF3

小鼠胚胎成纖維細胞 BALB/3T3 clone A31

小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞株 bEnd.3

小鼠胰島素瘤胰島Beta細胞 Beta-TC-6

小鼠小膠質(zhì)細胞 BV2

小鼠神經(jīng)干細胞 C17.2

小鼠成肌細胞 C2C12

小鼠胚胎成纖維細胞 C3H/10T1/2 Clone8  

小鼠結(jié)腸癌細胞 CT26

小鼠結(jié)腸癌細胞熒光素酶標記 CT26+LUC

小鼠結(jié)腸癌細胞 CT26.WT

小鼠胚胎干細胞 E14

小鼠淋巴瘤細胞 EL-4

小鼠乳腺癌細胞 EMT6

小鼠膠質(zhì)細胞瘤 GL-261

小鼠膠質(zhì)細胞瘤熒光素酶標記 GL-261+luc

小鼠乳腺上皮細胞 HC11

小鼠肝癌細胞 HEPA1-6

小鼠肝癌細胞熒光素酶標記 HEPA1-6+LUC

小鼠海馬神經(jīng)元細胞 HT22

小鼠卵巢上皮癌細胞 ID8

小鼠單核巨噬細胞 J774A.1

小鼠骨肉瘤成骨細胞 K7M2WT (K7M2-wt)

小鼠骨肉瘤成骨細胞熒光素酶標記 K7M2WT(K7M2-WT)-LUC

小鼠肺癌細胞 LLC

小鼠肺癌細胞熒光素酶標記 LLC+LUC

小鼠淋巴瘤細胞 L5178Y TK+/- clone (3.7.2C)

小鼠成纖維細胞 L929

小鼠胰腺癌細胞 LTPA

小鼠乳腺癌高轉(zhuǎn)移細胞 MA-891

小鼠膀胱癌細胞 MB49

小鼠結(jié)腸癌細胞 MC38

小鼠結(jié)腸癌細胞熒光素酶標記 MC38+LUC

小鼠胚胎成骨細胞 MC3T3-E1

小鼠顱頂前骨細胞亞克隆14 MC3T3-E1subclone 14

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF

小鼠胚胎成纖維細胞 MEF(絲霉素C處理)

小鼠前胃癌細胞 MFC

小鼠正常肝細胞 NCTC1469（NCTC CLONE 1469）

小鼠腦神經(jīng)瘤細胞 neuro-2a

小鼠胚胎細胞 NIH/3T3

小鼠骨髓基質(zhì)細胞 OP9

小鼠雜交瘤（抗CD2）細胞 OKT11

小鼠畸胎瘤細胞 P19

小鼠白血病細胞 P388

小鼠肥大細胞瘤細胞 P815

小鼠源基于MLV-10A1逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝細胞系 PT-67

小鼠單核巨噬細胞白血病細胞 RAW 264.7

小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞 RGC-5

小鼠前列腺癌細胞 RM-1

小鼠雜交瘤 SDOW-17

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0

小鼠骨髓瘤細胞 Sp2/0-Ag14

小鼠小腸內(nèi)分泌細胞 STC-1

小鼠腎小球系膜細胞 SV40-MES-13

小鼠淋巴結(jié)內(nèi)皮細胞 SVEC4-10

小鼠睪丸間質(zhì)細胞 TM3

正常小鼠睪丸Sertoli細胞 TM4

小鼠子宮頸癌細胞 U14

小鼠淋巴瘤細胞 YAC-1

透析胎牛血清（WINSERA，F(xiàn)BS500-WDF-002）

Q1、如何選用特殊細胞系培養(yǎng)基？

答：培養(yǎng)某一類型細胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細胞，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長。總之，選MEM做粘附細胞培養(yǎng)、RPMI-1640做懸浮細胞培養(yǎng)是一個好的開始。

Q2、何時須更換培養(yǎng)基？

答：視細胞生長密度而定， 或遵照細胞株基本數(shù)據(jù)上之更換時間，按時更換培養(yǎng)基即可。

Q3、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基？

答：不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細胞培養(yǎng)基， 若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基， 細胞大都無法立即適應(yīng)， 造成細胞無法存活。

Q4、培養(yǎng)基是否有必要避光保存？

答：是的。培養(yǎng)基中的一些成分是對光敏感的，如HEPES、精氨酸和核黃素等。

Q5、為何培養(yǎng)基保存于4°C 冰箱中，顏色會偏暗紅色， 且pH值會越來越偏堿性？

答：培養(yǎng)基保存于4°C冰箱中，培養(yǎng)基內(nèi)之CO2會逐漸溢出，造成培養(yǎng)基越來越偏堿性。而培養(yǎng)基中之酸堿指示劑(通常為phenol red) 的顏色也會隨堿性增加而更偏暗紅。培養(yǎng)基偏堿之結(jié)果，將造成細胞生長停滯或死亡。若培養(yǎng)基偏堿時，可以通入無菌過濾之CO2，以調(diào)整 pH 值。

Q6、貯存在冰箱中的瓶口已開的培養(yǎng)基，在放置幾天后顏色變紫?

答：這主要是由于在暴露到周圍的CO2水平時，碳酸氫納導(dǎo)致了pH值的上升。您可以在使用前松開瓶口，在CO2培養(yǎng)箱孵育培養(yǎng)基10-15分鐘，來校正溶液的pH值（確定松開瓶口以保證氣體交換）。

Q7、細胞培養(yǎng)基偶然被凍，可否繼續(xù)使用？

答：如果細胞培養(yǎng)基偶然被凍，可能會造成磷酸鹽或氨基酸的析出，您應(yīng)該將其加熱至37°C熔化培養(yǎng)基并觀察是否有沉淀產(chǎn)生。如果沒有沉淀產(chǎn)生，培養(yǎng)基可以正常使用，如果出現(xiàn)沉淀，只能丟棄這些培養(yǎng)基。

Q8、我觀察到培養(yǎng)基中存在沉淀，但pH值未改變。我該如何處理？

答：先確定培養(yǎng)基是否被冰凍過，如果有，可能會造成磷酸鹽或氨基酸的析出，嘗試將其加熱至37°C后通過搖動將沉淀溶解。如果仍有沉淀，請棄用此培養(yǎng)基。

Q9、我觀察到培養(yǎng)基中存在沉淀，pH值也發(fā)生改變。我該如何處理？

答：這最可能是細菌或真菌的污染信號。我們建議棄用培養(yǎng)基，同時嘗試對培養(yǎng)物進行去污染處理。

Q10、什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅？

答：酚紅在培養(yǎng)基中用作PH值的指示劑：中性時為紅色，酸性時為黃色，堿性時為紫色。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用，（特別是雌激素）。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細胞，尤其是哺乳類細胞時，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測，一些研究人員在做流式細胞檢測時，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。

Q11、培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？

答：丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。

Q12、L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)中重要嗎？它在溶液中不穩(wěn)定嗎？

答：L-谷氨酰胺在細胞培養(yǎng)時是重要的。脫掉氨基后，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細胞的能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時間后會降解，但是確切的降解率一直沒有最終定論。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對于一些細胞具有毒性。

Q13、培養(yǎng)基中HEPES的作用是什么？

答：HEPES（4乙磺酸）是一種常用的兩性離子緩沖液，在培養(yǎng)基中加入終濃度為10mM至25mM HEPES，可以提供額外的緩沖能力。防止培養(yǎng)中細胞的生長和代謝會導(dǎo)致培養(yǎng)基的環(huán)境pH值發(fā)生劇烈變化。

Q14、培養(yǎng)基及其它添加物和試劑可反復(fù)凍融嗎？

答：大部分添加物和試劑最多可以凍融3次，如果次數(shù)更多都會在包含蛋白的溶液引起一定水平的降解和沉淀，將會影響它的性能。

Q15、二價離子抑制胰蛋白酶活性嗎？使用胰蛋白酶時加入EDTA的目的是什么？

答：二價離子的確抑制胰蛋白酶活性。EDTA用來螯合游離的鎂離子和鈣離子，以便保持抑制胰蛋白酶的活性。建議胰蛋白酶處理細胞前，用EDTA清洗細胞，以消除來自培養(yǎng)基中所有的二價離子。

Q16、為什么要在溶解的一周內(nèi)使用貯存在4℃冰箱中的液體胰蛋白酶溶液?

答：胰蛋白酶在4℃就可能開始降解，如果在室溫下放置超過30分鐘，就會變得不穩(wěn)定。

Q17、CO2 培養(yǎng)箱中水盤作用？

答：培養(yǎng)箱中需要放入水盤保證培養(yǎng)環(huán)境的濕度，不然培養(yǎng)基中的水分很容易揮發(fā),使液體培養(yǎng)基濃縮，此外需要定期(至少每兩周一次) 以無菌蒸餾水或無菌去離子水更換之。

Q18、可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類？

答：血清是細胞培養(yǎng)上一個極為重要的營養(yǎng)來源，所以血清的種類和品質(zhì)對于細胞的生長會產(chǎn)生極大的影響。如果需要更換血清，需要逐步替換（替換濃度由25%，50%，75%。100%逐步進行），讓細胞有一個適應(yīng)過程，如果直接替換容易造成培養(yǎng)細胞的死亡。

Q19、培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后，可長期保存嗎？

答：一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時，您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解。

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