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有下列情況者,對(duì)血清內(nèi)毒素應(yīng)格外留意篩選:
1.養(yǎng)干細(xì)胞時(shí),干細(xì)胞對(duì)內(nèi)毒素非常敏感,如果血清中內(nèi)毒素≥3EU/ml時(shí),干細(xì)胞很容易死亡。很多使用者,在血清在試用前,就通過(guò)提早審核該批次《檢測(cè)報(bào)告》,以決定是否入圍進(jìn)行試用。
2.養(yǎng)免疫細(xì)胞時(shí),過(guò)高的內(nèi)毒素可誘導(dǎo)免疫細(xì)胞釋放炎癥因子,抑制小鼠紅細(xì)胞集落的形成等。
3.基因敲除相關(guān)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn),培養(yǎng)的細(xì)胞要盡可能保持其原始狀態(tài),任何引導(dǎo)細(xì)胞衰老或凋亡的試劑,都會(huì)讓后續(xù)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果“失之毫厘,謬以千里"。在準(zhǔn)備血清和其他試劑時(shí),選擇極低的內(nèi)毒素(最好≤1EU/ml),對(duì)實(shí)驗(yàn)至關(guān)重要;
4.原代培養(yǎng)、雜交瘤融合、細(xì)胞轉(zhuǎn)染,或者肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、內(nèi)皮等難養(yǎng)細(xì)胞的擴(kuò)增,這些都需要挑選好的血清給細(xì)胞以有力支持。因此,挑選更低的內(nèi)毒素,是保證實(shí)驗(yàn)順利的第一步。
5.實(shí)驗(yàn)室有些細(xì)胞,需要長(zhǎng)期培養(yǎng)、長(zhǎng)期凍存,或者經(jīng)常復(fù)蘇、經(jīng)常培養(yǎng)的,血清會(huì)經(jīng)?;蜷L(zhǎng)時(shí)間作用于細(xì)胞。為保證細(xì)胞的健康,都應(yīng)該選用更低內(nèi)毒素的血清,以避免內(nèi)毒素長(zhǎng)久對(duì)細(xì)胞的毒性影響。
總之,血清中內(nèi)毒素含量過(guò)高,更容易導(dǎo)致細(xì)胞“亞健康",造成數(shù)據(jù)不準(zhǔn),或細(xì)胞狀態(tài)不良、老化、甚至死亡,導(dǎo)致試驗(yàn)中斷失敗。血清中的內(nèi)毒素越低越好。
全球細(xì)胞培養(yǎng)學(xué)會(huì)均依據(jù)內(nèi)毒素對(duì)血清的品質(zhì)進(jìn)行分級(jí)和命名。
內(nèi)毒素含量越低的血清,級(jí)別就越高,以胎牛血清為例:
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≤10EU/ml時(shí),此血清為特級(jí)胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時(shí),此血清為優(yōu)級(jí)胎牛血清;
當(dāng)血清中內(nèi)毒素含量≥ 25EU/ml時(shí),此血清為標(biāo)準(zhǔn)級(jí)胎牛血清;
各種類(lèi)型的胎牛血清的用途是什么?
★ 我們需要知道都有哪些種類(lèi)的牛血清和它們的用途:
1、透析血清
分子量小于10,000的分子如氨基酸、葡萄糖、鹽離子和未結(jié)合的蛋白均被移除。透析血清主要用在進(jìn)行營(yíng)養(yǎng)成分優(yōu)化和標(biāo)定特定成分進(jìn)行研究的實(shí)驗(yàn)中。
2、碳吸附血清
使用活性和右旋糖苷去除血清中的親脂類(lèi)(lipophilic)物質(zhì),如某些激素、細(xì)胞因子、生長(zhǎng)因子等,去除作用對(duì)分子量大小并無(wú)區(qū)分。碳吸附胎牛血清常用于體外培養(yǎng)研究驗(yàn)證激素的作用效果。
3、去外泌體血清
適用于收集細(xì)胞分泌的外泌體時(shí)使用。
4、低IgG血清
用于研究抗體、病毒和病毒反應(yīng)、細(xì)胞表面抗原表位。
5、四環(huán)素血清
應(yīng)用于使用敏感四環(huán)素誘導(dǎo)表達(dá)系統(tǒng)的細(xì)胞培養(yǎng)(Tet-on, Tet-off),以及其它對(duì)四環(huán)素敏感的實(shí)驗(yàn)中。
6、IR (輻照)
鈷60伽馬輻照劑量在3.5Mrad. 通過(guò)直接與間接作用將生物大分子(如核酸)鍵結(jié)破壞,人畜用藥物/疫苗,及對(duì)微生物負(fù)荷(Bioburden)要求水平的實(shí)驗(yàn)。
7、HI (熱滅活)處理血清
56℃, 30Min, 破壞補(bǔ)體,確保細(xì)胞與抗體結(jié)合不會(huì)發(fā)生裂解。
8、胚胎干細(xì)胞(ES)專(zhuān)用血清
是從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),適用于人及小鼠胚胎干細(xì)胞、成體干細(xì)胞及原代細(xì)胞長(zhǎng)期培養(yǎng)。
9、間充質(zhì)干細(xì)胞(MSC)專(zhuān)用血清
從多個(gè)批次的胎牛血清篩選出特定批號(hào),經(jīng)過(guò)骨髓,脂肪組織及臍帶來(lái)源的間充質(zhì)干細(xì)胞的細(xì)胞活性嚴(yán)格測(cè)試,通過(guò)傳代及分化比例測(cè)試。
其他動(dòng)物血清
10、馬血清
10%馬血清可代替FBS用于支持SRBC的體外抗體應(yīng)答, 常與牛血清結(jié)合或單獨(dú)作為哺乳動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的補(bǔ)充培養(yǎng)基。
11、豬血清
豬血清在染色體研究中表現(xiàn)非常出色,可用于淋巴細(xì)胞培養(yǎng), 疫苗生產(chǎn)(生產(chǎn)支原體), 中和脂質(zhì)體包裹的腺相關(guān)病毒(AAV), 用于誘導(dǎo)大鼠肝纖維化, 作為酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)中的標(biāo)準(zhǔn)陰性參考。
12、兔血清
正常兔血清可作為免疫分析的阻斷劑和對(duì)照。在免疫組織化學(xué)和免疫細(xì)胞化學(xué)方面,各種研究均采用20%或1:200稀釋兔血清作為阻斷劑。
13、羊血清
用于生物醫(yī)學(xué)研究的大多數(shù)細(xì)胞系和原代培養(yǎng)物上,F(xiàn)BS的合適替代物,病毒分離和鑒定,病毒學(xué)研究。
用作魚(yú)類(lèi)細(xì)胞培養(yǎng)的有效NBCS替代物。
可成功地代替胎牛血清在生長(zhǎng)培養(yǎng)基中長(zhǎng)期用于環(huán)孢蘑菇的體外繁殖。
WINSERA®胎牛血清 | 貨號(hào) | 規(guī)格 | 庫(kù)存狀態(tài) |
優(yōu)級(jí) | FBS500-WS-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
特級(jí) | FBS500-WP-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
ES級(jí)別 | FBS500-WE-002 | 500ML | 現(xiàn)貨 |
無(wú)外泌體血清 | FBS050-EXO | 50ML | 現(xiàn)貨 |
WINSERA®特級(jí)胎牛血清適合培養(yǎng)哪些細(xì)胞?
1、特級(jí)胎牛血清具有非常越的促細(xì)胞生長(zhǎng)能力,適合培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞,原代細(xì)胞,部分干細(xì)胞和嬌貴細(xì)胞。
2、血清如何保存, 可以放多久?
3、貯藏溫度≤-15℃,可長(zhǎng)時(shí)間保存; 4℃存放時(shí),請(qǐng)勿超過(guò)一個(gè)月。
4、血清溶解以后,出現(xiàn)沉淀怎么辦?
5、若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無(wú)菌離心管內(nèi),以400-600g離心5min,上清液即可加入培養(yǎng)基內(nèi)一起培養(yǎng)。 我們不建議您以過(guò)濾的方法去除這些絮狀沉淀物, 一方面它可能會(huì)阻塞您的過(guò)濾膜;另一方面,過(guò)濾血清這種行為可能會(huì)導(dǎo)致血清中部分營(yíng)養(yǎng)成分的流失。